1.眼/鼻腔拭子:将拭子头在宠物眼角和结膜下轻轻擦拭3-5次采集;有眼泪时可采集适量的眼泪作为样本,使用同一根,同时用拭子头在宠物鼻腔处轻轻擦拭3-5次采集,将拭子头折断于一次性使用病毒采样管中。
2.口腔/咽部拭子:新取一根拭子,将拭子头伸入宠物咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处拭抹3-5次采集,或在口腔创面拭抹3-5次采集,收集粘膜细胞,将拭子头折断于同一支一次性使用病毒采样管中,充分震荡混匀待用。
1.肛拭子:将拭子头用生理盐水润湿,然后插入肛门约1-2cm处,轻轻转动拭子,采集结直肠表面粘液或黄便后取出,将拭子头折断于一次性使用病毒采样管中。
2.
1.胸水/腹水:取200μL胸水/腹水直接提取核酸。
2.淋巴穿刺组织液、脑脊液:直接取200μL液体进行核酸提取;若不足200μL,至少取50μL以上,直接进行核酸提取。
3.尿液:取200μL尿液直接提取核酸。
取200μL的EDTA抗凝血,直接提取核酸。(不可用肝素抗凝管采集抗凝血)
1、眼睛鼻子共用一根棉签,先采眼睛后采鼻子,口腔单独用一根棉签,不得用病毒保存管中液体润湿后接触宠物的眼口鼻。
2、猫口炎六项和人宠共患十一项要求采EDTA血和眼口鼻的混合样本,取EDTA血100μL和含有眼口鼻采样棉签的病毒保存液100μL,分别加入到核酸提取管中的加样品处。
3、加200μL样本前,应混匀样本。核酸提取试剂使用前应向下甩动,使液体全部置于管底。
4、提取试剂放入仪器提取仓时,不得放反方向,有标签的朝外即朝向操作者。
6、核酸提取完成后,将磁棒套取下置于生物安全垃圾袋中,打开提取仓紫外线消毒15-30分钟。已取走核酸后的提取管应进行封口,防治污染环境。
7、PCR检测试剂使用前应向下甩动,使液体置于管底,然后用移液枪吸足10μL核酸提取产物加入到PCR检测试剂中,每只管中均加入,加入后盖好,应确认管内无气泡,向下甩动,使液体全部沉于管底。
8、扩增上机前,确保PCR试剂管盖盖紧,防止实验过程中蒸发和气溶胶污染,摆放时有数字面朝向操作者,不得放反方向,扩增完成后禁止打开,丢弃于生物安全垃圾袋中。